Tes darah untuk tms apa itu

Diet

Tandem mass spectrometry (TMS) adalah salah satu metode modern untuk menganalisis senyawa, yang secara luas digunakan untuk berbagai tujuan ilmiah dan praktis. Metode ini memungkinkan untuk analisis beberapa ratus senyawa dalam jumlah jejak bahan biologis.

Di mana metode ini berlaku?

Di dunia praktik kesehatan masyarakat metode ini digunakan untuk melakukan skrining massal pada bayi baru lahir untuk penyakit metabolik keturunan (NBO). Di tempat darah kering, penentuan asam amino (termasuk fenilalanin) dan asil karnitin adalah mungkin. Penentuan kuantitatif zat ini memungkinkan untuk mengecualikan beberapa lusin penyakit keturunan yang termasuk ke berbagai kelas NBO (gangguan metabolisme asam amino, asam organik dan cacat β-oksidasi mitokondria asam lemak). Menurut data literatur asing, frekuensi total mereka adalah 1: 2.000 bayi yang baru lahir hidup. Sebelumnya, diagnosis gangguan ini membutuhkan sejumlah besar bahan biologis, beberapa penelitian (analisis asam amino, kromatografi gas / spektrometri massa, penentuan spektrum acylcarnitines), yang membutuhkan banyak waktu dan biaya material. TMS memungkinkan Anda untuk mengukur semua senyawa ini dalam satu analisis!

Penyakit apa yang bisa dideteksi dengan menggunakan metode ini?

Sayangnya, satu tes universal yang sangat sensitif dan spesifik untuk mendiagnosis semua NBO yang dikenal belum ada, tetapi teknologi yang bertujuan mengidentifikasi beberapa lusin dan bahkan ratusan penyakit dalam satu analisis sudah menjadi kenyataan. Metode-metode ini termasuk TMS. Metode ini memungkinkan dengan keyakinan tinggi untuk mendeteksi sekitar 40 gangguan metabolisme yang diturunkan dari asam amino, asam organik dan defek mitokondria beta-oksidasi asam lemak. Sebagian besar penyakit ini terjadi pada periode neonatal. Daftar penyakit yang dapat didiagnosis menggunakan teknologi ini diberikan di bagian analisis http://labnbo.ru/prajs-list

Mengapa perlu untuk mendiagnosis penyakit metabolik sedini mungkin?

Banyak dokter keliru percaya bahwa NBO sangat jarang sehingga mereka harus dikecualikan hanya terakhir, dan sangat sering diagnosis yang benar sudah ditetapkan pada tahap selanjutnya atau penyakit tidak didiagnosis sama sekali.

Namun, lebih dari 150 bentuk NBO sudah diketahui yang mana metode terapi yang efektif telah dikembangkan dan kehidupan dan kesehatan pasien sangat tergantung pada seberapa cepat dan benar diagnosis dibuat. Untuk 20 penyakit yang dapat didiagnosis menggunakan TMS, perawatan khusus telah dikembangkan. Didiagnosis tepat waktu - menyelamatkan nyawa dan kesehatan pasien!

Aturan untuk mengumpulkan sampel darah

Darah dikumpulkan pada kartu penyaring standar (No. 903), yang digunakan untuk menyaring bayi yang baru lahir untuk PKU. Darah bisa berupa kapiler (jari, tumit) atau vena. Hal ini diperlukan untuk menjenuhkan area yang dipilih dengan baik pada filter! Kartu filter harus dengan jelas menunjukkan nama, oleh siapa dan dari mana pasien, tanggal lahir dan nomor telepon dokter yang hadir dikirim. Sampel dikeringkan selama 2-3 jam di udara. Dianjurkan untuk melampirkan ekstrak dari sejarah.

Contoh pengumpulan darah yang tepat:

Contoh pengambilan sampel darah abnormal:

Banyak bintik kecil

Sampel tidak sepenuhnya kering, sebagai akibat dari sampel yang kabur selama transportasi.

Kertas saring direndam dalam darah.

Tautan yang berguna:

(NCBI) adalah sumber informasi biologi molekuler nasional yang didirikan pada tahun 1988. Database PubMed berisi lebih dari 15.000.000 artikel dari berbagai jurnal biomedis (dalam bahasa Inggris).

Katalog gen manusia dan penyakit genetik, yang dibuat oleh Dr. V.A. McKusick dan rekan-rekannya (dalam bahasa Inggris).

(SSIEM) - Masyarakat untuk Studi Penyakit Metabolisme Hereditary (Kesalahan Metabolisme Kongenital).

Lembaga Ilmiah Anggaran Negara Federal "Pusat Penelitian Genetika Medis"

Portal informasi tentang penyakit langka, kemungkinan pengobatan dan diagnosisnya untuk pasien dengan penyakit langka

The All-Russian Society of Rare Diseases didirikan pada 2012 atas prakarsa pasien, keluarga dan ahli mereka. Saat ini, organisasi WHO menyatukan lebih dari 400 pasien dari 47 wilayah Federasi Rusia dengan 63 penyakit langka.

Tes darah untuk tms apa itu

Selama bertahun-tahun, skrining terutama dilakukan dengan tes khusus untuk masing-masing penyakit. Sebagai contoh, skrining PKU didasarkan pada evaluasi mikrobiologi atau kimia dari peningkatan fenilalanin.

Situasi ini telah benar-benar berubah selama dekade terakhir dengan munculnya teknologi tandem mass spectrometry (TMS). Analisis tandem mass spectrometry (TMS) tidak hanya dapat secara akurat dan cepat mengungkapkan fenilalanin tinggi dalam noda darah pada bayi baru lahir dengan tanggapan positif palsu yang lebih sedikit dibandingkan dengan metode lama, tetapi juga memungkinkan beberapa lusin gangguan biokimia lainnya untuk dideteksi.

Beberapa dari mereka telah disaring dengan tes individual. Misalnya, banyak negara menggunakan tes khusus untuk mendeteksi peningkatan metionin untuk mendeteksi Tandem Mass Spectrometry (TMS) juga terbukti menjadi metode yang dapat diandalkan untuk skrining non-onatal penyakit tertentu yang memenuhi kriteria screening, tetapi tidak memiliki tes yang dapat diandalkan sebelumnya.

Misalnya, defisiensi MCAD adalah penyakit oksidasi asam lemak, biasanya asimtomatik, tetapi secara klinis dapat dideteksi ketika pasien meningkatkan katabolisme. Deteksi kekurangan MCAD saat lahir dapat menjadi penting, karena anak-anak yang sakit memiliki risiko yang sangat tinggi dari hipoglikemia yang mengancam jiwa pada anak usia dini dengan kondisi katabolik yang disebabkan oleh penyakit yang menular, seperti infeksi virus.

Hampir seperempat anak-anak dengan kekurangan MCAD yang tidak terdiagnosis meninggal pada episode pertama hipoglikemia. Dengan perawatan yang tepat, gangguan metabolisme dapat dihentikan. Ketika MCAD tidak mencukupi, tujuan utama skrining adalah untuk memperingatkan orang tua dan dokter tentang risiko dekompensasi metabolik, karena anak-anak antara serangan praktis sehat dan tidak perlu perawatan harian, kecuali untuk pengecualian puasa yang berkepanjangan.

Namun, penggunaan spektrometri massa tandem (TMS) untuk skrining neonatal masih dipertanyakan. Selain memastikan pengujian cepat dari banyak gangguan, skrining neonatal yang sudah dilakukan atau dapat dibenarkan, tandem mass spectometry (TMS) juga mengungkapkan bayi baru lahir dengan kesalahan metabolisme bawaan seperti methylmalonic acidemia, yang biasanya tidak termasuk dalam program skrining karena kelangkaan dan kesulitan mereka. terapi akhir yang melindungi terhadap kerusakan neurologis yang progresif.

Penyakit terdeteksi oleh spektrometri massa tandem

I. Aminoacidemia:
- PKU
- Penyakit urine dengan sirup maple
- Homocystinuria
- Citrullinemia
- Arginine mengandung gula aciduria
- Tyrosinemia tipe I

Ii. Asidemia organik:
- Propionic Acidemia
- Methylmalonic Acidemia
- Isovaleric Acidemia
- Terisolasi 3-metil-crotonyl-glycinemia
- Glutaric acidemia (tipe I)
- Defisiensi mitokondria acetoacetyl-coA-thiolase
- Hydroxymethylglutaric acidemia
- Kegagalan banyak ko-karboksilase

III. Pelanggaran oksidasi asam lemak:
- Kegagalan SCAD
- Skema kekurangan hidroksi
- Kegagalan MCAD
- Kegagalan VLCAD
- Kekurangan LCAD dan kekurangan protein fungsional
- Glutarat acidemia tipe II
- Defisiensi carnitine palmitoyltransferase II

Tandem mass spectrometry (TMS) juga dapat mengidentifikasi metabolit abnormal dengan nilai kesehatan yang belum ditentukan. Misalnya, defisiensi SCAD adalah penyakit oksidasi asam lemak lain, paling sering tanpa gejala, meskipun beberapa pasien mungkin mengalami kesulitan dengan hipoglikemia episodik. Dengan demikian, nilai prediksi dari analisis tandem mass spectrometry (TMS) positif untuk SCAD simptomatis kemungkinan sangat rendah.

Apakah keuntungan mendeteksi kekurangan SCAD lebih besar daripada efek negatif dari tes, yang menyebabkan kecemasan orang tua yang tidak beralasan, untuk mayoritas bayi yang baru lahir dengan hasil tes positif yang tidak pernah menunjukkan gejala klinis? Dengan demikian, tidak setiap penyakit yang dideteksi oleh tandem mass spectrometry (TMS) memenuhi kriteria untuk skrining neonatal.

Itulah mengapa beberapa ahli dalam sistem perawatan kesehatan berpendapat bahwa orang tua dan dokter hanya perlu diberitahu tentang penyimpangan dalam metabolit dengan manfaat klinis yang terbukti. Yang lain menganjurkan penggunaan semua informasi yang disediakan oleh tandem mass spectrometry (TMS), dan mengusulkan untuk memberi tahu orang tua dan dokter tentang semua metabolit abnormal, terlepas dari seberapa baik penyakit tersebut memenuhi kriteria standar untuk skrining neonatal. Di masa depan, Anda dapat dengan hati-hati memantau pasien dengan anomali nilai yang tidak diketahui. Untuk semua alasan ini, penggunaan spektrometri massa tandem (TMS) untuk skrining bayi baru lahir tetap menjadi bahan perdebatan.

Untuk skrining populasi pada periode prenatal, dua tes biasanya digunakan: analisis kromosom pada wanita yang lebih tua dan serum ibu AFP atau tes triple untuk DNT dan aneuploidy kromosom.

Jika kehamilan berisiko karena prosedur invasif untuk diagnosis prenatal aneuploidi kromosom karena usia ibu, pemeriksaan tambahan juga harus ditawarkan, seperti menentukan tingkat AFP dalam cairan ketuban, hibridisasi komparatif genomik lengkap untuk mencari penghapusan submikroskopik yang berbahaya, skrining untuk mutasi mucoviscidosis dan penyakit lain yang sering terjadi.

Tes darah untuk tms apa itu

Spektrometri massa tandem adalah salah satu metode modern untuk menganalisis senyawa, yang secara luas digunakan untuk berbagai tujuan ilmiah dan praktis. Metode ini memungkinkan untuk analisis beberapa ratus senyawa dalam jumlah jejak bahan biologis. Di dunia praktik kesehatan masyarakat metode ini digunakan untuk skrining massal bayi baru lahir untuk penyakit metabolik keturunan (NBO). Di tempat darah kering, penentuan asam amino (termasuk fenilalanin) dan asil karnitin adalah mungkin. Penentuan kuantitatif zat ini memungkinkan untuk mengecualikan beberapa lusin penyakit keturunan yang termasuk ke dalam kelas yang berbeda dari NBO (gangguan metabolisme asam amino, asam organik dan defek dari mitokondria b-oksidasi asam lemak). Sebelumnya, diagnosis gangguan ini membutuhkan sejumlah besar bahan biologis, beberapa penelitian (analisis asam amino, kromatografi gas / spektrometri massa, penentuan spektrum acylcarnitines), yang membutuhkan banyak waktu dan biaya material. TMS memungkinkan Anda untuk mengukur semua senyawa ini dalam satu analisis! Gangguan turun temurun metabolisme asam amino, asam organik dan defek mitokondria beta-oksidasi asam lemak terdiri dari sekitar 100 bentuk nosokologis, yang sebagian besar bermanifestasi dalam periode neonatal. Frekuensi mereka lebih dari 1: 5000 bayi yang baru lahir hidup. Banyak dokter keliru percaya bahwa penyakit pada kelompok ini sangat jarang sehingga mereka harus dikeluarkan hanya terakhir, dan sangat sering diagnosis yang benar sudah ditetapkan pada tahap selanjutnya atau penyakit tidak didiagnosis sama sekali.

Selama analisis, 52 indikator ditentukan (asam amino dan asil karnin)

Bahan uji: darah kapiler dalam bentuk kering

Persiapan untuk penelitian: tidak

Hari-hari penerimaan: selama jam buka pusat medis

№ НБО1, Pemutaran bayi baru lahir. "PINGULUS" (analisis spektrum asam amino dan asil karnitin)

  • Kasus serupa penyakit dalam keluarga.
  • Kasus kematian mendadak seorang anak pada usia dini di keluarga.
  • Kemerosotan tajam dalam kondisi anak setelah periode singkat perkembangan normal (periode asimtomatik dapat berkisar dari beberapa jam hingga beberapa minggu).
  • Bau tubuh dan / atau urine yang tidak biasa ("manis", "tikus", "kubis rebus", "kaki berkeringat", dll.).
  • Gangguan neurologis - gangguan kesadaran (kelesuan, koma), berbagai jenis kejang kejang, perubahan tonus otot (otot hypotonia atau tetraparesis spastik).
  • Gangguan irama pernafasan (bradypnea, tachypnea, apnea).
  • Gangguan dari organ dan sistem lain (kerusakan hati, hepatosplenomegali, kardiomiopati, retinopati).
  • Perubahan parameter laboratorium darah dan urine - neutropenia, anemia, asidosis metabolik / alkalosis, hipoglikemia / hiperglikemia, peningkatan aktivitas enzim hati dan tingkat creatine phosphokinase, ketonuria.
  • Diagnostik tambahan 37 penyakit metabolisme keturunan bersama dengan program negara wajib untuk mendeteksi 5 penyakit keturunan: skrining bayi yang baru lahir: "PECHET".

Interpretasi hasil penelitian mengandung informasi untuk dokter yang hadir dan bukan diagnosis. Informasi dalam bagian ini tidak dapat digunakan untuk diagnosis diri dan perawatan diri. Diagnosis yang akurat dibuat oleh dokter, menggunakan kedua hasil pemeriksaan ini dan informasi yang diperlukan dari sumber lain: anamnesis, hasil pemeriksaan lain, dll.

Satuan ukuran di laboratorium INVITRO: µmol / liter.

LABORATORIUM PENYAKIT PENYAKIT HEREDITER

Indikasi untuk analisis TMS

Diagnosis klinis gangguan metabolisme bawaan asam amino, asam organik dan defek b-oksidasi mitokondria mungkin sulit, karena penyakit ini tidak memiliki tanda dan gejala spesifik tertentu. Itulah mengapa studi semua pasien dari departemen patologi bayi baru lahir, unit perawatan intensif anak-anak dapat membantu dalam deteksi cepat penyakit keturunan ini.

Indikasi untuk mempelajari asil karnitin dan asam amino dengan metode TMS adalah:


7. Perubahan parameter darah dan urin - trombositopenia, neutropenia, anemia, asidosis metabolik / alkalosis, hipoglikemia / hiperglikemia, peningkatan enzim hati dan kadar creatin fosfokinase, ketonuria.

Analisis genetik

Anak-anak perempuan, ahli neuropatologi merujuk kita pada genetika (dia mengatakan bahwa cerebral palsy bukan merupakan diagnosis kita, meskipun dia membawa perawatan ke sanatorium). Katakan padaku, siapa yang menemukan ini, berapa kira-kira? Saya masih tidak tahu apa yang akan kami kirim, tetapi saya ingin tahu jumlah yang harus disiapkan, ini bukan tes darah umum...

Aplikasi seluler "Happy Mama" 4.7 Berkomunikasi dalam aplikasi jauh lebih nyaman!

Saya tidak bisa mengatakannya. semuanya bisa. dan semuanya berbeda

Kami memberi banyak hal! Karyotype 4.000 rubel, TMS 4.000 rubel, asam amino urin 4 kali (10.000 rubel untuk semua), asam amino darah 4 kali juga sekitar 10.000 rubel, sindrom Drave 12.000 rubel, laktat berkali-kali, konsultasi itu sendiri bukan genetika murahan dan banyak lagi “ hal-hal sepele. ”Skrining genetik tidak murah!

Tes darah multi-steroid: definisi hormon manusia yang vital pada level yang secara kualitatif baru

Istilah "analisis multi-steroid" mengacu pada penentuan profil hormon steroid oleh spektrometri massa kromatografi gas. Totalitas hasil analisis ini dilambangkan dengan istilah "profil steroid". Intinya, ini adalah dua istilah yang setara untuk hal yang sama.

Analisis multisteroid adalah pengembangan domestik, metode analisis divalidasi dan disertifikasi sebagai "Metode (metode) untuk mengukur konsentrasi massa hormon steroid dalam sampel darah menggunakan kromatografi cair - spektrometri massa tandem. MU 08-47 / 376", terdaftar di registri ROSSTANDART di bawah nomor RF.1.31.2015.21875.

Saat ini, analisis multi-steroid tidak termasuk dalam daftar tes yang disetujui oleh Kementerian Kesehatan Federasi Rusia, dan dilakukan sebagai bagian dari studi ilmiah. Pasien sendiri harus membayar biaya analisis ini. Pekerjaan sedang dilakukan untuk memastikan bahwa di masa depan biaya ini ditanggung oleh asuransi.

Penentuan kuantitatif hormon steroid utama dan metabolitnya dalam serum atau cairan saliva dengan metode referensi - tandem chromatography-mass spectrometry (dalam literatur ilmiah metode ini juga disebut sebagai LC-MS / MS) adalah prosedur yang memakan waktu dan mahal. Fitur kunci dari metode ini adalah kemampuan untuk menentukan semua analit yang dinyatakan dalam perjalanan analisis tunggal (Gambar 1), oleh karena itu, dalam hal satu analit, biaya penentuan diperoleh hampir kurang dari metode imunokimia alternatif.

Gambar 1. Analit, ditentukan dalam proses analisis tunggal, sesuai dengan metode

Mengapa nama "darah" biomaterial atas nama teknik tersebut?

Untuk segera mengidentifikasi perbedaannya dari analisis "profil urin steroid" yang terkenal. Perlu dicatat bahwa kandungan informasi dari analisis urin benar-benar berbeda dan memerlukan interpretasi yang berbeda, karena urin mengandung kebanyakan bentuk steroid yang tidak aktif: sulfat, glukuronida dan turunan terhidroksilasi, sudah tidak diperlukan untuk tubuh, dan berasal darinya. Dalam darah, konsentrasi bentuk aktif hormon steroid yang beredar dalam sistem suplai darah umum, memasuki sel dan memiliki efek sinyal pada genom ditentukan.

Dalam kondisi medis apa penentuan profil darah steroid yang ditunjukkan, dokter mana yang profil darah steroid akan membantu dengan diagnosis?

1. Berbagai bentuk disfungsi kongenital dari korteks adrenal (VDCN). VDCH adalah penyakit bawaan, diwujudkan dalam pelanggaran biosintesis steroid. Hal ini disebabkan oleh disfungsi salah satu dari 5 enzim korteks adrenal. Ini mungkin kekurangan 21a-hidroksilase (CYP21) atau 11b-hydroxylase (CYP11B1). Skrining tradisional pada bayi baru lahir untuk HBRA oleh immunoassay sering memberikan hasil positif palsu dalam menentukan 17-hydroxyprogesterone. Oleh karena itu, dalam semua kasus yang dapat disengketakan, diagnosa konfirmasi dengan metode LC-MS / MS diperlukan [1]. Mendiagnosis bentuk non-klasik VDKN (NF VDKN) dengan metode imunokimia adalah kesulitan yang signifikan, oleh karena itu NF VDKN sering tidak didiagnosis selama skrining neonatal, tetapi membuat dirinya merasa sebagai akibatnya: remaja mengembangkan rambut tubuh prematur, jerawat; pada anak perempuan, hirsutisme, disfungsi menstruasi, dan gangguan reproduksi. Peningkatan 21-deoxycortisol dan 17-OH-progesterone adalah karakteristik dari profil steroid di NF VDKN, oleh karena itu, analisis multi-steroid dikombinasikan dengan pengujian genetik sangat berguna untuk mendiagnosis penyakit ini.

2. Insufisiensi adrenal. Untuk ini, tes stimulasi dengan ACTH dilakukan dan tingkat kortisol, aldosteron, dan 11-deoksikortisol diukur: basal, 30 dan 60 menit setelah stimulasi. Pada insufisiensi adrenal primer, aldosteron tidak merespon rangsangan, sementara pada insufisiensi sekunder, peningkatan tingkatnya dicatat. Pada kelompok kontrol, tingkat 11-deoxycortisol meningkat 15-20 kali sebagai respons terhadap stimulasi ACTH, dan kortisol meningkat sekitar 3 kali [2].

3. Hipogonadisme pada pria. Diagnosis yang tepat dari hipogonadisme pada pria membutuhkan penentuan tingkat yang tepat dari total testosteron (TT) menggunakan spektrometri massa. Dalam sebuah penelitian pada 10.000 relawan, ditemukan bahwa hipogonadisme dapat didiagnosis jika konsentrasi TT di bawah 12,1 nmol / l menurut spektrometri massa [3].

4. Kontrol terapi substitusi pada pria dan wanita (HRT). Untuk kategori pasien ini, spektrometri massa adalah "standar emas" karena memungkinkan Anda untuk memilih dosis terapi yang tepat dari hormon (atau stimulan), mengikuti secara detail respons semua metabolit terhadap terapi pengganti dan menghindari gangguan dengan metode imunokimia [4-6].

5. Sangat penting untuk memantau kadar hormon steroid selama kehamilan dan selama satu tahun setelah melahirkan. Analisis multi-steroid memberikan informasi yang jauh lebih akurat tentang status androgenik dibandingkan dengan DHEA-sulfat tradisional.

6. Ginekologi. Virilizing (androgen-producing) tumor kelenjar adrenal memiliki aktivitas penghasil androgen dan menyebabkan perkembangan sindrom viral pada wanita. Telah ditetapkan bahwa hampir setiap tumor ovarium yang aktif secara hormon dapat menjadi sumber produksi androgen dan / atau estrogen yang berlebihan dan harus didiagnosis menggunakan metode spektrometri massa tandem [7].

7. Diabetes. Penyakit ini mempengaruhi sistem saraf dan mempengaruhi konsentrasi neurosteroid. LC-MS / MS memungkinkan untuk menentukan konsentrasi steroid neuroaktif dalam rangka mengembangkan pendekatan baru dalam pengobatan nefropati diabetik [8].

8. Obat olah raga. Profil steroid pada atlet dalam darah dan air liur dapat memberikan informasi penting tentang kesehatan, kebugaran, dan mengontrol jalannya pelatihan karena distribusi beban yang optimal.

Analisis multi-steroid menyulitkan untuk membuat tempat bagi dirinya sendiri dalam kehidupan, dengan mempertimbangkan meluasnya penggunaan metode immunoassay dan resistensi dari penganut teknologi tradisional. Namun di balik metode ini adalah masa depan, itu sudah diakui sebagai wakil terbaik ilmu kedokteran [9].

Apa itu ALS

Amyotrophic lateral sclerosis adalah bentuk paling umum dari penyakit neuron motorik, yang merupakan penyakit neurodegeneratif yang mempengaruhi neuron motorik di otak dan sumsum tulang belakang.

Diagnosis ALS

Gejala ALS dapat berbeda dari satu orang ke orang lain, karena penyakit memiliki karakter individu dan tingkat perkembangan.

Amyotrophic lateral sclerosis sangat sulit didiagnosis karena beberapa alasan:

  • ini adalah penyakit langka;
  • gejala awal cukup ringan, seperti kejanggalan, kecanggungan di tangan atau pidato yang sedikit lelah, yang semuanya mungkin karena alasan yang sama sekali berbeda;
  • penyakit mempengaruhi setiap orang dengan cara yang berbeda, tidak ada gejala pasti yang dengan jelas mendefinisikan ALS.

Jika terapis memiliki kecurigaan bahwa dia memiliki pasien ALS, dia harus merujuknya ke ahli saraf. Kemudian seseorang mungkin memiliki serangkaian pemeriksaan diagnostik yang dapat dilakukan baik pada pasien rawat jalan dan di departemen rawat inap.

Tes darah

Studi akan menunjukkan apakah tingkat kreatin kinase meningkat dalam darah. Enzim ini diproduksi ketika jaringan otot dihancurkan, dan tingkatnya dapat meningkat pada orang dengan ALS. Tetapi indikator ini bukan merupakan tanda khusus dari ALS, karena ini dapat menjadi indikator penyakit lain.

Electroneuromyography (ENMG)

Dengan ENMG, jarum tipis digunakan untuk mendaftarkan impuls saraf di otot-otot individu. Rekaman biasanya dibuat dari setiap otot tungkai dan bulbar (faring). Otot yang telah kehilangan persarafan mereka ditemukan karena aktivitas listrik mereka berbeda dari aktivitas otot yang sehat. Hasil ENMG dapat berbeda dari norma, bahkan jika otot tertentu belum dipengaruhi oleh penyakit.

Ketika ENMG periksa kecepatan impuls sepanjang serabut saraf. Untuk melakukan ini, impuls kecil dilewatkan melalui paking kecil yang bersentuhan dengan kulit. Ini adalah metode diagnostik yang sangat penting untuk penelitian.

Stimulasi magnetik transkranial (TMS)

Ini adalah metode baru yang dapat dilakukan bersamaan dengan ENMG. Ini dirancang untuk menilai keadaan neuron motorik otak. Hasil TMS dapat membantu dalam membuat diagnosis.

Magnetic Resonance Imaging (MRI)

MRT dapat mendeteksi kerusakan pada sistem saraf yang disebabkan oleh stroke, penyakit Alzheimer, penyakit Parkinson, multiple sclerosis, tumor dan cedera sumsum tulang belakang dan otak. MRT tidak mengungkapkan perubahan spesifik dalam ALS, karena kerusakan yang disebabkan oleh penyakit ini tidak mempengaruhi gambar. Metode penelitian ini digunakan untuk menyingkirkan penyakit dengan gejala mirip ALS.

Metode lainnya

Ahli saraf dapat memutuskan untuk melakukan pemeriksaan tambahan seperti pungsi lumbal atau biopsi otot, jika sesuatu menunjukkan kebutuhan mereka. Tetapi tes ini tidak selalu digunakan dalam diagnosis ALS.

Aplikasi tandem
spektrometri massa (HPLC-MSMS)
dalam diagnosis klinis

Spektrometri massa adalah prospek untuk pengembangan kimia klinis, masa depan di mana sebuah revolusi dalam diagnostik klinis akan mengarah pada meluasnya penggunaan spektrometri massa.
(Michael Ulerich, Departemen Kimia Klinis, Universitas Georg-August, Göttingen, Jerman)

Menurut sebuah ulasan yang diterbitkan dalam Tinjauan Biokimia Klinis, penggunaan kromatografi cair kinerja tinggi yang dikombinasikan dengan spektrometri massa tandem (HPLC-MS / MS) di laboratorium klinis telah meningkat pesat selama 10-12 tahun terakhir. Para penulis mencatat bahwa spesifisitas dari analisis HPLC-MS / MS secara signifikan lebih unggul daripada metode imunologi dan kromatografi cair kinerja tinggi klasik (HPLC) dalam analisis molekul dengan berat molekul rendah dan memiliki kinerja yang secara signifikan lebih tinggi daripada spektrometri massa kromatografi gas (GC-MS). Popularitas metode ini dalam analisis klinis rutin saat ini dijelaskan oleh kemampuan unik dari metode ini.

    Keuntungan utama dari metode HPLC-MS / MS adalah:

  • Kemungkinan analisis kuantitatif yang akurat dari molekul-molekul kecil;
  • Analisis simultan dari beberapa senyawa target;
  • Spesifisitas unik;
  • Analisis kecepatan tinggi.
  • Dalam beberapa tahun terakhir, banyak perhatian telah diberikan pada waktu analisis dan, akibatnya, pada peningkatan produktivitas laboratorium. Pengurangan waktu analisis yang signifikan dimungkinkan oleh penggunaan kolom analitik singkat untuk HPLC / MS / MS, sementara secara tajam meningkatkan spesifisitas analisis. Penggunaan metode ionisasi pada tekanan atmosfer (API), spektrometer massa tardem triple quadrupole dan kromatografi cair kinerja tinggi yang canggih, serta metode yang tepat untuk persiapan sampel, memimpin HPLC-MS / MS ke garis depan metode analitis modern untuk studi klinis.

      Bidang utama penerapan HPLC / MS / MS dalam kedokteran klinis adalah:

  • Mendapatkan profil metabolisme lengkap steroid (panel steroid), purin dan pirimidin dan senyawa lainnya,
    skrining bayi baru lahir untuk kesalahan metabolisme bawaan (identifikasi beberapa lusin penyakit dalam satu analisis);
  • Pemantauan terapeutik obat-obatan - imunosupresan, perivosudorozhnyh, antiretroviral, antikoagulan, dan lainnya - terlepas dari keberadaan kit pabrik. Anda tidak perlu membeli kit mahal untuk setiap zat - Anda dapat mengembangkan metode Anda sendiri;
  • Toksikologi klinis - analisis lebih dari 500 senyawa narkotika dan metabolitnya dalam satu analisis, tanpa analisis konfirmasi
    proteomik dan metabolomik.
  • Selain itu, HPLC-MSMS digunakan untuk menyaring oligosakarida urine, sulfatides, asam lemak rantai panjang, asam empedu rantai panjang, asam methylmalonic, studi porfiri, skrining pasien dengan gangguan metabolisme purin dan pirimidin.

    Contoh penerapan kromatografi cair
    dalam kombinasi dengan spektrometri massa tandem dalam analisis klinis.

    Skrining pada bayi baru lahir: Contoh pertama penggunaan besar HPLC-MS / MS dalam diagnosis klinis adalah skrining kesalahan metabolisme bawaan pada bayi baru lahir. Saat ini di negara-negara maju, ini adalah metode rutin dan mencakup lebih dari 30 penyakit yang berbeda, termasuk acetademias, aminoacidopathies, dan defek oksidasi asam lemak. Dari catatan khusus adalah studi cacat lahir yang dapat menyebabkan masalah serius jika tindakan segera tidak dilakukan (misalnya, pembesaran jantung atau hati atau edema otak). Keuntungan menggunakan HPLC-MS / MS untuk skrining bayi baru lahir adalah kemampuan untuk menganalisis secara simultan semua asam amino dan asil karnitin dengan metode cepat, murah dan sangat spesifik.

    Pemantauan obat terapeutik: Pengembangan dan pengenalan sirolimus imunosupresan (rapamycin) untuk mencegah penolakan organ setelah transplantasi adalah salah satu insentif utama untuk memperkenalkan HPLC-MS / MS ke laboratorium klinis. Metode HPLC-MS / MS saat ini memungkinkan penentuan tacrolimus, sirolimus, cyclosporin, everolimus dan asam mycophenoic secara bersamaan.

    HPLC-MS / MS juga digunakan untuk menganalisis sitotoksik, obat antiretroviral, antidepresan trisiklik, antikonvulsan, dan obat lain yang memerlukan dosis individu.

    Metode HPLC-MSMS memungkinkan pemisahan dan kuantifikasi R-dan S-enansiomer warfarin dalam rentang konsentrasi 0,1-500 ng / ml.

    Zat narkotik dan analgesik: HPLC-MS / MS banyak digunakan untuk analisis senyawa ini karena kesederhanaan persiapan sampel dan waktu analisis singkat. Saat ini, metode ini digunakan di laboratorium klinis untuk skrining untuk kehadiran berbagai macam zat narkotika. Kekhususan dan kepekaan unik dari metode ini memungkinkan untuk menganalisis secara bersamaan lebih dari 500 senyawa dari kelas yang berbeda dalam satu sampel dengan persiapan sampel minimal. Jadi, dalam kasus analisis urin, pengenceran sederhana sampel 50-100 kali sudah cukup. Ketika menganalisa rambut, bukannya satu bundel dari 100-200 rambut, satu rambut saja cukup untuk secara andal mendeteksi fakta-fakta konsumsi obat-obatan narkotika.

    Analisis endokrinologi dan steroid: HPLC-MS / MS banyak digunakan di banyak laboratorium endokrinologi untuk analisis steroid - testosteron, kortisol, aldersteron, progesteron, estriol dan banyak lainnya.

    Semakin banyak laboratorium mulai menggunakan HPLC-MS / MS untuk menentukan kadar vitamin D3 dan D2 dalam darah.

    I. Definisi steroid (profil steroid).

    Laboratorium di rumah sakit dan klinik saat ini mampu melakukan penentuan simultan dari beberapa steroid menggunakan HPLC / MS / MS. Pada saat yang sama, tidak diperlukan volume sampel yang besar, yang sangat penting ketika menganalisis sampel anak-anak.

      Kasus di mana disarankan untuk membuat penentuan beberapa steroid (profiling):

  • Hiperplasia adrenal kongenital (hiperplasia adrenal kongenital, CAH) adalah defek kongenital dalam biosintesis steroid. Ini adalah kelompok penyakit turunan yang disebabkan oleh aktivitas yang tidak tepat dari enzim korteks adrenal, yang menyebabkan penurunan produksi kortisol. Untuk diagnosis SAN yang andal, disarankan untuk menentukan kortisol, androstenedione, dan 17-hydroxyprogesterone. HPLC / MS / MS memungkinkan penentuan kuantitatif akurat dari ketiga steroid dalam satu analisis tunggal dengan akurasi 100%.
  • Skrining rutin bayi baru lahir menggunakan immunoassays ditandai dengan tingkat tinggi hasil positif dan negatif palsu. Penentuan HPLC / MS / MS tidak hanya kortisol, tetapi juga aldosterone dan 11-deoxycortisol memungkinkan untuk membedakan ketidakcukupan primer korteks adrenal dari sekunder.
  • HPLC / MS / MS memungkinkan penentuan steroid untuk prostatitis dan sindrom nyeri panggul kronis.
  • HPLC-MS / MS memungkinkan Anda untuk menentukan profil steroid dan mengidentifikasi penyebab pubertas dini terkait dengan korteks adrenal pada anak-anak. Ditemukan bahwa konsentrasi testosteron, androstenedione, dehydroepiandrosterone (DHEA) dan sulfat pada anak-anak ini sedikit lebih tinggi daripada pada anak yang lebih tua pada kelompok kontrol.
  • Serum darah perokok aktif, perokok pasif dan non-perokok dianalisis untuk kehadiran 15 hormon steroid dan hormon tiroid untuk mempelajari hubungan antara pasien yang terpapar asap dan konsentrasi hormon.
  • HPLC / MS / MS digunakan untuk profil hormon steroid wanita tertentu dalam urin.
  • Menggunakan HPLC / MS / MS, konsentrasi hormon neuroactive dievaluasi untuk mencegah neuropati diabetik.
  • Ii. Penentuan hormon tiroid

    Metode rutin untuk menentukan hormon tiroid biasanya didasarkan pada radioimmunoassay, yang mahal dan hanya memungkinkan T3 dan T4 yang akan ditentukan, yang dapat membatasi kemampuan untuk menentukan dan sepenuhnya mengontrol fungsi kelenjar tiroid.

    • Saat ini, menggunakan HPLC-MSMS, analisis simultan dilakukan dalam sampel serum dari lima hormon tiroid, termasuk tiroksin (T4), 3,3 ′, 5-triiodothyronine (T3), 3,3 ′, 5′- (rT3), 3, 3'-diiodothyronine (3,3'-T2) dan 3,5-diiodothyronine (3,5-T2) dalam rentang konsentrasi 1-500 ng / ml.
    • Metode HPLC / MS / MS juga digunakan untuk menganalisis komposisi hormon pasien yang menjalani tiroidektomi. Tingkat konsentrasi tiroksin (T4), triiodothyronine (T3), T4 gratis dan stimulating thyroid hormone (TSH) setelah operasi ditentukan. HPLC / MS / MS telah ditemukan menjadi cara terbaik untuk membangun hubungan antara TSH dan konsentrasi hormon tiroid.
    • Metode HPLC / MS / MS digunakan untuk menentukan thyroxin (T4) dalam saliva dan serum manusia. Metode ini ditandai dengan reproduksibilitas, akurasi, dan batas deteksi yang tinggi sebesar 25 pg / ml. Penelitian telah menunjukkan bahwa ada hubungan diagnostik dalam konsentrasi T4 dalam air liur antara subyek eutiroid dan pasien dengan penyakit Graves.

    Metode HPLC / MS / MS saat ini memiliki kepekaan, spesifisitas dan akurasi yang diperlukan untuk menentukan semua steroid dalam cairan biologis secara andal dan dengan demikian meningkatkan kemampuan diagnostik, terutama dalam kasus penentuan set steroid.

    III. Penentuan 25-oxyvitamin D oleh HPLC / MS / MS

    25-hydroxy vitamin D (25OD) adalah bentuk sirkulasi utama vitamin D dan prekursor bentuk aktifnya. (1,25-dioxivitamin D). Mengingat jangka waktu paruh yang panjang, penentuan 25OD penting untuk menentukan status vitamin D dalam tubuh pasien. Vitamin D ada dalam dua bentuk: vitamin D3 (cholecalciferol) dan vitamin D2 (ergocalciferol). Kedua bentuk dimetabolisme menjadi bentuk 25OD yang sesuai. Ketersediaan metode analitik yang dapat menentukan kedua bentuk vitamin dengan akurasi tinggi dan memungkinkan pemantauan pasien dengan gangguan vitamin D sangat penting untuk diagnosis Metode yang digunakan sejauh ini tidak memungkinkan penentuan vitamin D2 dan D3 secara terpisah. Selain itu, pada konsentrasi tinggi vitamin D2, jumlah D3 yang dapat dideteksi diremehkan. Kerugian lain adalah penggunaan isotop radioaktif. Penggunaan metode HPLC / MS / MS memungkinkan tidak hanya untuk menghindari penggunaan isotop radioaktif, tetapi juga untuk melaksanakan penentuan terpisah dari kedua bentuk aktif dari vitamin.

        Metode ini berlaku untuk pasien berikut:

  • Jika Anda mencurigai kandungan rendah vitamin D dalam tubuh;
  • Jika suatu efek toksik yang tidak dapat dijelaskan dicurigai;
  • Ketika memeriksa pasien yang menjalani perawatan untuk kandungan rendah vitamin D;
  • Penggunaan HPLC / MS / MS memungkinkan penentuan terpisah dari kedua bentuk selama pemantauan pasien.
  • Iv. Penentuan imunosupresan oleh HPLC / MS / MS

    Setelah transplantasi organ, perlu untuk mengambil imunosupresan sepanjang hidup untuk menghindari reaksi penolakan. Memiliki rentang terapeutik yang sangat sempit dan toksisitas yang tinggi, imunosupresan membutuhkan dosis individu untuk mencapai efek maksimum. Oleh karena itu, penting untuk memantau imunosupresan utama: siklosporin A, tacrolimus, sirolimus dan everolimus untuk mengontrol dosis obat untuk setiap pasien tergantung pada konsentrasi obat dalam darah.

    Immunoassay masih digunakan untuk memantau obat-obatan yang terdaftar, tetapi metode ini mahal dan spesifisitas, akurasi dan reproduktifitas mereka terbatas. Ada kasus kematian pasien dari dosis imunosupresan yang tidak tepat, berdasarkan hasil yang diperoleh dengan menggunakan metode imunologi. Saat ini, immunoassays sedang diganti di laboratorium klinis dengan HPLC / MS / MS. Dengan demikian, sekitar 70 sampel dianalisis setiap hari di University of Munich Clinic untuk kandungan sirolimus dan cyclosporin A menggunakan sistem HPLC / MS / MS. Semua persiapan sampel dan kontrol perangkat dilakukan oleh satu karyawan. Laboratorium juga beralih ke analisis tacrolimus dengan metode ini.

    • Penggunaan HPLC / MS / MS untuk penentuan simultan tacrolimus, sirolimus, ascomycin, demetiksisirolimus, cyclosporin A dan siklosporin G dalam darah secara rutin telah dijelaskan. Kisarannya ditentukan oleh konsentrasi 1,0 - 80,0 ng / ml. Untuk siklosporin 25 - 2000 ng / ml. Selama setahun, lebih dari 50.000 sampel dianalisis di laboratorium.
    • Karena ditemukan bahwa penggunaan simultan tacrolimus dan sirolimus memiliki efek terapeutik positif, metode HPLC / MS / MS yang sederhana dan efektif dikembangkan untuk penentuan terpisah dalam darah untuk analisis klinis. Analisis satu sampel membutuhkan 2,5 menit dengan akurasi 2,46% - 7,04% untuk tacrolimus dan 5,22% - 8,30% untuk sirolimus untuk seluruh kurva analitis. Batas bawah penentuan tacrolimus adalah 0,52 ng / ml, sirolimus - 0,47 ng / ml.

    V. Penentuan homocysteine ​​oleh HPLC / MS / MS

    Homosistein menarik perhatian penyakit kardiovaskular (tromboemboli, penyakit jantung, aterosklerosis) dan kondisi klinis lainnya (depresi, penyakit Alzheimer, osteoporosis, komplikasi selama kehamilan, dll.). Tes homocysteine ​​yang ada, termasuk imunoassays, mahal. Metode HPLC / MS / MS cepat telah dikembangkan untuk menganalisis homocysteine ​​untuk penggunaan klinis rutin ketika menganalisis sejumlah besar sampel. Ionisasi dilakukan dengan metode electrospray. Metode ini dapat direproduksi, sangat spesifik dan akurat. Keuntungan dari metode ini adalah biaya reagen dan kemudahan preparasi sampel yang rendah. Adalah mungkin untuk menganalisis 500 atau lebih sampel per hari.

    Kesimpulan

    Perlu dicatat bahwa meskipun metode immunoassay secara signifikan ditingkatkan saat ini sedang digunakan, karena keterbatasan mendasar teknis, metode ini tidak akan pernah memiliki presisi dan spesifisitas terhadap substansi target sebanding dengan HPLC-MSMS, terutama di hadapan metabolit. Ini tidak hanya mengarah ke akurasi rendah dari metode ELISA dan persentase yang tinggi dari hasil positif palsu dan hasil negatif palsu, tetapi juga tidak memungkinkan membandingkan hasil yang diperoleh di departemen klinis yang berbeda menggunakan metode ELISA. Penggunaan HPLC-MS / MS menghilangkan kelemahan ini, memungkinkan untuk analisis yang sangat spesifik, akurat dan cepat dari sejumlah besar sampel dengan keyakinan tinggi akan keberadaan metabolit dan tanpa adanya gangguan dari zat terkait dan endogen dalam plasma dan darah pasien.

    Meskipun biaya instrumen kompleks tinggi, seperti yang ditunjukkan oleh praktek dunia, dengan operasi yang tepat, kompleks ini terbayar dalam 1-2 tahun. Hal ini terutama disebabkan oleh biaya rendah dari satu analisis karena analisis simultan dari puluhan dan ratusan koneksi dan tidak adanya kebutuhan untuk membeli peralatan diagnostik yang mahal. Selain itu, laboratorium memiliki kesempatan untuk secara mandiri mengembangkan metode analisis yang diperlukan dan tidak bergantung pada pembuat kit.

    Memilih konfigurasi yang tepat dari kompleks instrumen

    Ada sejumlah besar metode yang berbeda dari spektrometri massa dan jenis spektrometer massa yang dirancang untuk menyelesaikan berbagai tugas - dari identifikasi struktural makromolekul protein kompleks yang beratnya ratusan ribu Dalton ke analisis kuantitatif kinerja tinggi yang rutin dari molekul kecil.

    Untuk solusi sukses dari tugas, salah satu kondisi dasar adalah pilihan jenis peralatan yang tepat. Tidak ada perangkat universal yang memungkinkan untuk menyelesaikan seluruh rentang tugas analitis. Dengan demikian, perangkat yang dirancang untuk memecahkan masalah identifikasi mikroorganisme tidak mampu melakukan analisis kuantitatif terhadap molekul kecil. Dan sebaliknya. Faktanya adalah bahwa, meskipun nama umum, ini benar-benar perangkat yang berbeda beroperasi pada prinsip-prinsip fisik yang berbeda. Dalam kasus pertama, ini adalah spektrometer massa waktu-penerbangan dengan sumber ionisasi laser, MALDI-TOF, dan yang kedua, quadrupole tiga kali dengan ionisasi elektrospray, HPLC-MSMS.

    Parameter terpenting kedua adalah pilihan konfigurasi sistem yang benar. Ada beberapa produsen peralatan spektrometri massal. Setiap perangkat pabrikan tidak hanya memiliki kekuatan mereka sendiri, tetapi juga kelemahan, yang biasanya mereka lebih suka berdiam diri. Masing-masing produsen menghasilkan perangkatnya sendiri. Biaya satu kompleks analitis adalah dalam kisaran $ 100.000 hingga 1.000.000 atau lebih banyak dolar. Pilihan produsen yang optimal dan konfigurasi peralatan yang benar tidak hanya akan menghemat sumber daya keuangan yang signifikan, tetapi juga lebih efektif dalam menyelesaikan tugas. Sayangnya, ada banyak contoh ketika laboratorium dilengkapi tanpa memperhitungkan faktor-faktor ini. Hasilnya - peralatan menganggur, uang terbuang.

    Faktor ketiga yang menentukan keberhasilan laboratorium adalah staf. Spektrometer massa membutuhkan personel berkualifikasi tinggi. Sayangnya, tidak ada satu pun universitas di Rusia yang memiliki mata kuliah spektrometri massa praktis modern, terutama dalam kaitannya dengan aplikasi klinis, dan tugas melatih staf masing-masing laboratorium harus diselesaikan dengan sendirinya. Tentu saja, 2-3 hari pelatihan sosialisasi yang dilakukan oleh produsen setelah peluncuran peralatan benar-benar tidak cukup untuk memahami dasar-dasar metode dan memperoleh keterampilan dalam perangkat.

    Faktor keempat adalah kurangnya metode analisis siap pakai. Setiap laboratorium memiliki prioritasnya sendiri, yang perlu untuk mengembangkan metode mereka sendiri. Ini dapat dilakukan oleh seseorang dengan setidaknya 2-3 tahun pengalaman dalam perangkat. Perusahaan manufaktur kadang-kadang menyediakan satu atau dua metode umum sifat rekomendasi, tetapi tidak menyesuaikannya dengan tugas khusus di laboratorium.

    Di "BioPharmEkspert" LLC ada spesialis dengan pengalaman bertahun-tahun bekerja pada berbagai jenis spektrometer massa, serta pengembangan metode dan perumusan analisis kinerja tinggi. Oleh karena itu, kami menyediakan layanan berikut:

    1. Pemilihan konfigurasi optimal perangkat untuk tugas-tugas spesifik klien.
    2. Pembelian, pengiriman dan start-up peralatan dari produsen terkemuka spektrometer massa tandem.Pelatihan karyawan secara bertahap dalam waktu satu tahun dari saat meluncurkan peralatan.
    3. Seperangkat metode dan database siap pakai untuk memecahkan masalah klinis dasar.
    4. Pengembangan metode analisis dan pemecahan tugas spesifik klien di laboratoriumnya dengan keterlibatan stafnya.
    5. Dukungan metodis di semua tahap kerja.

    Tes darah dengan derivatisasi awal (TMS-derivatif)

    Kromatografi gas dua dimensi - spektrometri massa waktu-terbang untuk analisis plasma dengan derivatisasi awal (TMS-derivatif), menunjukkan penentuan glukosa 5TMS

    Analisis metabolit plasma darah dengan menggunakan kromatografi gas dua-dimensi-waktu-penerbangan spektrometri massa dengan derivatisasi awal (TMS-derivatif) menunjukkan deteksi glukosa 5TMS dengan tingkat kebetulan 901.

    Artikel Berikutnya

    Vaksin hepatitis B